Nowy zestaw do wykrywania kwasu nukleinowego w koronawirusie (SARS-Cov-2).

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Flurudascent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Pproduktt name 】Zestaw do wykrywania kwasu nukleinowego nowego wirusa koronowego (SARS-Cov-2) (metoda fluorescencyjnej sondy RT-PCR)

【Packaging specjeślications 】25 testów/zestaw

【Intended uswiek】

Zestaw ten służy do jakościowego wykrywania kwasu nukleinowego nowego koronaawirusa w wymazach z nosogardzieli, wymazach z jamy ustnej i gardła, wymazach z przedniego nosa, wymazach ze środkowej części małżowiny nosowej, popłuczynach nosa i aspiratach z nosa pobranych od osób podejrzanych o zakażenie Covid19 przez lekarza. Wykrycie genów ORF1ab i N nowego koronaawirusa może zostać wykorzystane do diagnostyki pomocniczej i monitorowania epidemiologicznego infekcji nowym koronawirusem.

【Principles of the procedure 】

Zestaw ten jest przeznaczony dla specyficznych sond TaqMan i specyficznych starterów zaprojektowanych dla sekwencji genów ORF1ab i N nowego wirusa koronowego (SARS-Cov-2). Roztwór do reakcji PCR zawiera 3 zestawy specyficznych starterów i sond fluorescencyjnych do specyficznego wykrywania obiektów docelowych, a dodatkowy zestaw specyficznych starterów i sond fluorescencyjnych służy jako wewnętrzna kontrola standardowa zestawu do wykrywania endogennych genów metabolizmu podstawowego.

Zasada testu polega na tym, że specyficzna sonda fluorescencyjna jest trawiona i rozkładana przez aktywność egzonukleazy enzymu Taq w reakcji PCR, w wyniku czego reporterowa grupa fluorescencyjna i wygaszona grupa fluorescencyjna zostają oddzielone, dzięki czemu system monitorowania fluorescencji może otrzymać sygnał fluorescencyjny sygnał, a następnie poprzez efekt wzbogacenia amplifikacji PCR, sygnał fluorescencji sondy osiąga ustaloną wartość progową-wartość Ct (próg cyklu). W przypadku braku docelowego amplikonu, grupa reporterowa sondy znajduje się blisko grupy wygaszającej. W tym momencie następuje transfer energii rezonansu fluorescencji, a fluorescencja grupy reporterowej jest wygaszana przez grupę wygaszającą, tak że sygnał fluorescencyjny nie może zostać wykryty przez fluorescencyjny instrument PCR.

W celu monitorowania użycia odczynników w trakcie testu zestaw wyposażony jest w kontrolę pozytywną i negatywną: kontrola pozytywna zawiera rekombinowany plazmid w miejscu docelowym, a kontrola negatywna to woda destylowana, która służy do monitorowania zanieczyszczenia środowiska. Zaleca się jednoczesne ustawienie kontroli dodatniej i ujemnej podczas badania.

【Main componets 】

Notatka:(1) Nie można mieszać ani zamieniać składników różnych zestawów seryjnych.

(2) Przygotuj własny odczynnik: Zestaw do ekstrakcji kwasu nukleinowego.

【Storage condtoons I expiration date 】

For BST-SARS-25:Transportuj i przechowuj przez długi czas w temperaturze -20±5℃.

For BST-SARS-DR-25:Transport w temperaturze pokojowej. Przechowywać przez dłuższy czas w temperaturze -20±5℃.

Unikaj powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania. Okres ważności został wstępnie ustalony na 12 miesięcy.

Na etykiecie znajduje się data produkcji i użytkowania.

Po pierwszym otwarciu odczynnik można przechowywać w temperaturze -20±5°C nie dłużej niż 1 miesiąc lub do końca okresu ważności odczynnika, w zależności od tego, która data przypada wcześniej, aby uniknąć powtarzających się cykli zamrażania i rozmrażania oraz liczby zamrożeń odczynnika -cykle rozmrażania nie powinny przekraczać 6 razy.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1. Odpowiedni typ próbki: roztwór ekstrahowanego kwasu nukleinowego.

2. Przechowywanie i transport próbek: Przechowywać w temperaturze -20±5°C przez 6 miesięcy. Zamrażać i rozmrażać próbki nie więcej niż 6 razy.

【Tzałing mettaczki】

1.Nucleic acid extraction

Wybierz odpowiedni zestaw do ekstrakcji kwasu nukleinowego w celu ekstrakcji wirusowego kwasu nukleinowego i postępuj zgodnie z instrukcjami odpowiedniego zestawu. Zaleca się stosowanie zestawu do ekstrakcji i oczyszczania kwasów nukleinowych wyprodukowanego przez Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. lub równoważnego zestawu do oczyszczania kwasów nukleinowych.

2.  Rkażdytion wieknt preparation

2.1 For BST-SARS-25:

( 1) Usuń mieszankę SARS-Cov-2 i mieszaninę enzymów, całkowicie rozpuść w temperaturze pokojowej, dokładnie wymieszaj za pomocą urządzenia Vortex, a następnie krótko odwiruj.

(2) 16,5 µl mieszanki enzymatycznej dodano do 358,5 µl mieszanki SARS-Cov-2 i dokładnie wymieszano, aby otrzymać zmieszany roztwór reakcyjny.

(3) Przygotuj czystą probówkę ósemkową do PCR o pojemności 0,2 mL i oznacz ją 15 µl powyższego zmieszanego roztworu reakcyjnego na studzienkę.

(4) Dodać 15 µl oczyszczonego roztworu kwasu nukleinowego, kontrolę dodatnią i kontrolę ujemną i ostrożnie zamknąć ósemkową zakrętkę probówki.

(5) Dobrze wymieszaj, odwracając probówkę do góry nogami i szybko odwiruj, aby zagęścić płyn na dnie probówki.

1